國外某生物醫(yī)療單位已有顯微鏡，希望看FITC ?PI熒光染色切片

流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡(FITC-PI)

實(shí)驗(yàn)方法：

1．用6孔板培養(yǎng)細(xì)胞，待細(xì)胞生長達(dá)到60%-70%，吸出舊培養(yǎng)基，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求處理，繼續(xù)培養(yǎng)。

2．根據(jù)實(shí)驗(yàn)處理時(shí)間，把細(xì)胞培養(yǎng)液吸出至一合適離心管內(nèi)，PBS洗滌貼壁細(xì)胞一次，加入適量胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞。室溫孵育至輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，吸除胰酶細(xì)胞消化液。需避免胰酶的過度消化。（注意：懸浮細(xì)胞不需要胰酶消化，直接收集到離心管即可）

3．加入步驟(2)中收集的細(xì)胞培養(yǎng)液，稍混勻，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，1000g離心5min，棄上清，收集細(xì)胞，用PBS輕輕重懸細(xì)胞并計(jì)數(shù)。（注意：加入步驟2）中的細(xì)胞培養(yǎng)液一方面可以收集已經(jīng)懸浮的發(fā)生凋亡或壞死的細(xì)胞，另一方面細(xì)胞培養(yǎng)液中的血清可以有效抑制或中和殘留的胰酶；殘留的胰酶會(huì)消化并降解后續(xù)加入的Annexin V-FITC導(dǎo)致染色失敗。

解決方案：

明美外貿(mào)同事和客戶溝通后推薦了明美熒光模塊MF-B-LED,當(dāng)時(shí)覺得長通的模塊還是能看到PI,和技術(shù)等溝通評估后換成窄帶，成功解決了這個(gè)問題；明美熒光模塊可配藍(lán)色、綠色、寶藍(lán)、紫外等激發(fā)光組；可應(yīng)用于呼吸道疾病、生殖道疾病、結(jié)核桿菌、自身免疫性疾病等領(lǐng)域熒光的檢測。通過推拉滑塊即可在明場或熒光的觀察方式之間進(jìn)行切換；不僅可以匹配明美顯微鏡使用，也可以匹配其他廠家顯微鏡，例如：奧林巴斯顯微鏡，尼康顯微鏡（以上顯微鏡，均采用無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng) ）；方便顯微鏡升級改造。良好的表現(xiàn)，貼切的價(jià)格，會(huì)讓你驚嘆！

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