提要:超分辨光學成像技術(shù)是目前國際上光學領(lǐng)域的一個重要研究方向,在此領(lǐng)域的取得的研究成果使西安光機所在超分辨光學顯微成像技術(shù)方面躋身于世界前列。該技術(shù)的成果轉(zhuǎn)化將改變我國在超分辨光學顯微鏡市場沒有自主知識產(chǎn)權(quán)高端科學儀器的局面。該技術(shù)通過與生物醫(yī)學、材料化學等學科的交叉合作,將大大提高我國在該領(lǐng)域的研究水平。
眾所周知,光學成像技術(shù)在人類探索和發(fā)現(xiàn)未知世界奧秘的活動中扮演著重要的角色。大到宇宙,小到分子,看得更遠、更細、更清楚是人們不斷追求的目標。但受限于光的衍射特性,傳統(tǒng)光學系統(tǒng)的空間分辨率不可能無限小,存在著瑞利-阿貝物理極限。能否突破這個極限,繼續(xù)提高光學系統(tǒng)的成像分辨率?成為當今光學領(lǐng)域公認的一個重大研究課題。
雖然電子顯微鏡、原子力顯微鏡等技術(shù)可以獲得更高的分辨率,但由于各種原因和限制(如不能活體實時成像,樣品制備復雜),光學顯微鏡仍然是當前生物醫(yī)學、材料化學等學科研究中的主要觀測設(shè)備。但普通光學顯微鏡的橫向分辨率極限約為200nm,這對亞細胞結(jié)構(gòu)和分子生物學研究還不夠精細。為了突破衍射極限,近年來涌現(xiàn)出了不少光學超分辨方法,如光激活定位法(PLAM),隨機光學重構(gòu)法(STORM)、受激發(fā)射損耗法(STED)等。但受限于單分子定位算法或點掃描成像方式,這幾種超分辨技術(shù)成像速度較慢,而且需要一些特殊染料標記樣品。另外一種方式就是使用結(jié)構(gòu)光照明的顯微技術(shù)(SIM),它使用特殊調(diào)制的光場照明樣品,通過空間頻譜處理的方式獲得超分辨圖像。由于它屬于寬場成像方式,因此成像速度很快。SIM技術(shù)目前只有美國、德國、英國、瑞士、日本等幾個國家掌握,我國在這方面的研究相對滯后。
作為明美光電的客戶,中科院西安光學精密機械研究所瞬態(tài)光學與光子技術(shù)國家重點實驗室姚保利研究組長期從事光學微操縱技術(shù)和光學超分辨成像等生物光子技術(shù)的研究工作(其中光鑷技術(shù)已產(chǎn)品化)。自2010年開始SIM成像技術(shù)以來,在科技部重大科學研究計劃項目和國家自然科學基金項目支持下,開展了深入細致的理論和實驗研究工作,掌握了其中的關(guān)鍵技術(shù),并創(chuàng)新性地提出了與現(xiàn)有激光干涉照明SIM技術(shù)不同的方案(已申請國家發(fā)明專利),首次提出并實現(xiàn)了基于數(shù)字微鏡器件(DMD)和LED照明的SIM技術(shù)。該技術(shù)與激光干涉照明SIM技術(shù)相比,具有更高的空間分辨率,更快的成像速度和更好的圖像質(zhì)量,而且大大降低了裝置的復雜性和成本。經(jīng)標定,系統(tǒng)的橫向分辨率達到了90nm,這也是目前國際上同類技術(shù)的最好水平。
為了驗證該技術(shù)和樣機裝置在生物醫(yī)學上的實際應用效果,研究組與國內(nèi)第四軍醫(yī)大學和德國康斯坦茨大學進行了聯(lián)合實驗研究,利用該系統(tǒng)成功獲得了牛肺動脈內(nèi)皮細胞(BPAE)線粒體和小鼠腦神經(jīng)元細胞的超分辨圖像,并且還實現(xiàn)了小鼠腦神經(jīng)元細胞和植物花粉的三維光切片成像,其成像深度和成像速度比當前同類切片顯微技術(shù)均提高了約十倍,這對深層生物樣品的大面積快速三維成像提供了一種新的技術(shù)手段。該研究成果發(fā)表在1月23日出版的Nature子刊Scientific Reports上,論文題為DMD-based LED-illumination Super-resolution and optical sectioning microscopy。
超分辨光學成像技術(shù)是目前國際上光學領(lǐng)域的一個重要研究方向,本研究取得的成果使西安光機所在超分辨光學顯微成像技術(shù)方面躋身于世界前列。該技術(shù)通過與生物醫(yī)學、材料化學等學科的交叉合作,將大大提高我國在該領(lǐng)域的研究水平。同時該技術(shù)的成果轉(zhuǎn)化將改變我國在超分辨光學顯微鏡市場沒有自主知識產(chǎn)權(quán)高端科學儀器的局面。